炭素線誘発異種細胞間バイスタンダー効果の機構解析

Study on bystander effects induced by carbon-ion beams between normal fibroblasts and lung cancer cells

池田 裕子; 横田 裕一郎; 舟山 知夫; 武藤 泰子; 金井 達明*; 小林 泰彦

Ikeda, Hiroko; Yokota, Yuichiro; Funayama, Tomoo; Muto, Yasuko; Kanai, Tatsuaki*; Kobayashi, Yasuhiko

本研究では、がん細胞におけるp53がん抑制遺伝子のステータスに着目し、異種細胞間共培養実験下においてコロニー形成能の低下を指標としたバイスタンダー効果誘導の有無を検出することを目的とした。異種細胞間バイスタンダー効果の検討には、正常細胞としてヒト胎児肺由来正常線維芽細胞株WI-38を、がん細胞としてヒト肺がん細胞株H1299の遺伝子改変株であるH1299/wtp53(正常p53タンパク質を発現),H1299/mp53(変異p53タンパク質を発現),H1299/null(欠損型)を使用した。炭素線照射(18.3MeV/u, LET=108keV/m; Dose=0.5Gy)又は線照射(Dose=0.5Gy)した細胞と、非照射細胞を非接触で6時間又は24時間共培養した後、非照射細胞を回収して、それぞれのコロニー形成率から生存率を算出した。これまでに、炭素線あるいは線照射したH1299/wtp53細胞と非照射のWI-38細胞を共培養したとき、WI-38細胞の生存率は低下しないことを見いだした。この結果から、照射したH1299/wtp53細胞はバイスタンダー因子を放出していない可能性が示唆された。

The purpose of this study is to detect bystander effect between normal fibroblasts and lung cancer cells with different p53 status and to elucidate its mechanisms. In the study, we used human lung normal fibroblasts WI-38 line and human lung cancer cells H1299/wtp53 line that can produce normal p53 proteins in their DNA damage response. We irradiated cells with carbon-ion broad beams (18.3 MeV/u, LET = 108 keV/m; Dose = 0.5 Gy) or -rays (Dose = 0.5 Gy), then calculated survival rates of bystander cells after 6 or 24 hours cocultute of irradiated and non-irradiated cells. When we cocultured irradiated H1299/wtp53 cells with non-irradiated WI-38 cells, it was found that survival rates of WI-38 cells were not decreased at all. Consequently, it was suggested that bystander factors were not released from irradiated H1299/wtp53 cells.