Chemiluminescence ELISA for the detection of oxidative DNA base damage using anti-8-hydroxy-2'-deoxyguanosine antibody; Application to the detection of irradiated foods

抗8-hydroxy-2'-deoxyguanosine抗体を用いた酸化的DNA損傷検出のための化学発光ELISA法; 照射食品検知法への応用

菊地 正博; Gunawardane, C. R.; Alam, M. K.; Mohd Dzomir, A. Z.; Pitipanaarachchi, R. C.; 舟山 知夫; 浜田 信行*; 坂下 哲哉; 和田 成一*; 佐藤 勝也; 鳴海 一成; 小林 泰彦

Kikuchi, Masahiro; Gunawardane, C. R.; Alam, M. K.; Mohd Dzomir, A. Z.; Pitipanaarachchi, R. C.; Funayama, Tomoo; Hamada, Nobuyuki*; Sakashita, Tetsuya; Wada, Seiichi*; Sato, Katsuya; Narumi, Issei; Kobayashi, Yasuhiko

食糧の保存中の損耗防止や衛生確保,食中毒防止のために電離放射線を食品に照射する場合、その適切な管理には汎用性のある照射食品検知法(照射の有無の判別法)が必要である。そこで、照射食品と非照射食品を識別するため、抗8-OHdG抗体を用いた化学発光-酵素免疫測定(ELISA)法によるDNAの酸化的塩基損傷検出法を開発した。ELISA反応の条件検討は、8-hydroxyguanine(8-oxoG)を含む30-merのオリゴヌクレオチドを用いて行い、その条件でオリゴヌクレオチド中の8-oxoG含量と化学発光強度の関係が得られた。この化学発光ELISA法では、3kGyを越える線量で照射された鶏肉・豚肉・牛肉を識別できることが示唆された。この方法では、照射肉と非照射肉の識別に要する肉片は20mgで十分である。

Since ionizing radiation is used for sterilizing or lowering the microbial content of foods, the development of versatile detection methods of irradiated foods is necessary for appropriate management. In an effort to distinguish between irradiated and non-irradiated food, a method based on the detection of oxidative DNA base damage using the chemiluminescence enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) with anti-8-hydroxy-2'-deoxyguanosine antibody was developed. It was shown that this chemiluminescence ELISA method could be applied to chicken, beef and pork that were irradiated with over 3 kGy. Twenty milligrams of a loaf of meat was sufficient to distinguish between irradiated and non-irradiated meat by this method.