X線結晶回折法によるヒト由来薬物代謝酵素CYP2C9および一塩基置換体(*30)と抗高血圧薬ロサルタンの相互作用解析

Crystal structure of human drug metabolizing enzyme CYP2C9 in complex with losartan determined by X-ray crystallography

安達 基泰; 前川 京子*; 松澤 由美子*; 斎藤 嘉朗*; 黒木 良太

Adachi, Motoyasu; Maekawa, Keiko*; Matsuzawa, Yumiko*; Saito, Yoshiro*; Kuroki, Ryota

CYP2C9は、シトクロームP450に属し、ヒトの薬物代謝に関わる重要な酵素の一つである。本研究では、野生型CYP2C9及びそのSNPに由来する*30による薬物代謝の分子機構を解明するため、それらのCYP2C9と薬物との複合体のX線結晶構造解析を実施した。CYP2C9は、N末端領域を削除した遺伝子を大腸菌で発現および精製したものを、結晶化試料として用いた。ロサルタンとの複合体の結晶化は、共結晶化法により実施した。得られた結晶を用いて、放射光によるX線回折実験を行い、それぞれ2.1分解能の回折データを取得した。立体構造解析の結果、結合した薬物の電子密度が観測された。

CYP2C9 belongs to cytochrome P450 and play an important role as human drug metabolizing enzyme. In this study, to elucidate molecular mechanism in drug metabolizing reaction by wild-type CYP2C9 and its SNP mutant *30, X-ray structures of their CYP2C9 molecules complexed with the drug were determined. CYP2C9 was truncated at N-terminal, expressed in E. coli, and homogeneously purified for crystallization. CYP2C9 Losartan complex was crystallized by co-crystallization. As a result of experiments using synchrotron radiation, diffraction data were obtained at 2.1 resolution. The electron density maps of bound Losartan were observed in the both complexes.