重イオン線トラックによるDNA酸化損傷領域の蛍光抗体法による定量化; バックグラウンド低減処理による改善

Quantitative detection of heavy ion induced DNA oxidative damage by immunofluorescence method; Improvement by introducing background noise reduction process

浦野 建太; 伊藤 敦*; 高野 勇貴*; 大内 章央*; 平山 亮一*; 古澤 佳也*; 舟山 知夫*; 横田 裕一郎*

Urano, Kenta; Ito, Atsushi*; Takano, Yuki*; Ouchi, Fumihisa*; Hirayama, Ryoichi*; Furusawa, Yoshiya*; Funayama, Tomoo*; Yokota, Yuichiro*

DNA酸化産物8-ヒドロキシ-2'-デオキシグアノシン(8-OHdG)は、デオキシグアノシンの・OHとの反応産物であることはよく知られている。我々はこれまでに、重イオン線のトラック構造における線領域(ペナンブラ領域)におけるDNA損傷に着目し、水不溶性のシート状に加工したDNA(岡畑恵雄博士らにより開発されたもの、以後DNAシート)を用いて蛍光抗体法による可視化を行い、8-OHdGの生成領域が粒子種やLETにより変化する事を示してきた。令和元年度は、酸化損傷領域の広がりを定量化する目的で画像解析ソフトウェアImageJを用いて画像処理を行ったが、粒子痕由来の蛍光ドットと蛍光バックグラウンドの判別が難しいという問題点も明らかとなった。令和2年度は、バックグラウンドを除去する処理を考案し、酸化損傷領域のサイズを求め、Chatterjee and Schaeferによるトラック構造計算からのペナンブラサイズとの比較を行った。

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