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報告書

解体廃棄物におけるクリアランスレベル物量評価 -燃料材料試験施設-

近藤 等士; 櫛田 尚也; 滑川 卓志; 青木 法和; 宮崎 仁; 谷本 健一

JNC TN9410 2001-006, 43 Pages, 2000/12

JNC-TN9410-2001-006.pdf:1.49MB

国で検討されているRI・研究所等廃棄物のクリアランスレベル策定作業に資するために、現存施設解体時の廃棄物量(材質による区分、放射能レベルによる区分)の試算とそのクリアランスレベル物量の評価を行った。評価は、燃料材料試験施設(3施設)及び固体廃棄物前処理施設の4施設を対象として実施した。解体廃棄物量の試算及び評価結果は以下のとおりである。(1)燃料集合体試験施設(FMF)で発生する廃棄物量は約71,500t(コンクリートは約67, 500t、金属は約3,600t、その他は約300t)である。(2)照射燃料試験施設(AGF)で発生する廃棄物量は約14,200t(コンクリートは約13,300t、金属は約600t、その他は約200t)である。(3)照射材料試験施設(MMF)で発生する廃棄物量は約18,000t(コンクリートは約17,100t、金属は約700t、その他は約100t)である。(4)固体廃棄物前処理施設(WDF)で発生する廃棄物量は約28,600t(コンクリートは約27,900t、金属は約700t、その他は約20t)である。(5)評価の結果、各施設とも上記廃棄物のうちコンクリート廃棄物の全てと金属廃棄物の70%以上がクリアランスレベル以下の廃棄物となる。(6)クリアランスレベルが適用された揚合には、クリアランスレベル以下の廃棄物を放射性廃棄物から除外することにより、施設解体時における放射性廃棄物の発生量を大幅に低減できる。

口頭

超好熱性アーキア${it Thermococcus kodakaraensis}$におけるDNA polymerase B遺伝子破壊株の特徴

櫛田 卓志*; 鳴海 一成; 藤原 伸介*; 今中 忠行*; 東端 啓貴*

no journal, , 

${it T. kodakaraensis}$${it polB}$遺伝子について解析を進める過程で、ポリメラーゼドメインの保存領域であるRegion2が欠失した株を見いだし、PolBが細胞の生育に必須ではないことを発見した。本研究では、${it T. kodakaraensis}$においてPolBがDNA複製以外に果たす役割を解明することにより、アーキアのDNA複製機構に関し新たな知見を与えることを目的とした。今回、${it T. kodakaraensis}$ ${it polB}$遺伝子の完全破壊株の作製に成功した($$Delta$$${it polB}$株)。この株について17時間培養した菌体にUV,メチルメタンスルホン酸,マイトマイシンC,$$gamma$$線といったDNA損傷ストレスを与えた後、プレート上で培養した。その結果、親株に比して$$Delta$$${it polB}$株は、試みたすべてのDNA損傷ストレスに対し高い感受性を示すことが確認できた。この結果から、${it T. kodakaraensis}$において${it polB}$遺伝子は必須遺伝子ではないが、DNA修復機構に深く関与していることが示唆された。

口頭

超好熱性アーキア${it Thermococcus kodakaraensis}$ DNA PolB破壊株のDNA損傷ストレス感受性

倉内 康行*; 櫛田 卓志*; 鳴海 一成; 藤原 伸介*; 今中 忠行*; 東端 啓貴*

no journal, , 

超好熱性アーキア${it Thermococcus kodakaraensis}$にはファミリーB型のPolBとファミリーD型のPolDの2種類のDNAポリメラーゼが存在し、その両者がDNA複製において必須であると考えられてきた。しかし、われわれはこれまでに、${it T. kodakaraensis}$のDNAポリメラーゼ遺伝子のうち${it polB}$遺伝子破壊株($$Delta$$${it polB}$株)の取得に成功し、PolBが細胞の生育に必須ではないことを見いだした。本研究では、対数増殖期(5時間培養)の$$Delta$$${it polB}$株に対してDNA損傷ストレスを与えたところ、定常期の細胞に比して感受性の低下が見られた。対数増殖期に発現しているDNA修復関連酵素が PolBの機能を相補している可能性が示唆された。${it polB}$遺伝子が破壊されたことで変動する遺伝子群を調べることが今後の課題である。

口頭

超好熱性アーキア${it Thermococcus kodakarensis}$のDNA polymerase Bは細胞の生育に必須ではない

櫛田 卓志*; 倉内 康行*; 鳴海 一成; 藤原 伸介*; 今中 忠行*; 東端 啓貴*

no journal, , 

${it Thermococcus kodakaraensis}$${it polB}$遺伝子について解析を進める過程で、ポリメラーゼドメインの保存領域が欠失した変異株を取得し、PolBタンパク質が細胞の生育に必須ではない可能性を見いだした。本研究では、${it T. kodakaraensis}$においてPolBタンパク質のDNA複製機構以外に果たす役割を解明することにより、超好熱性アーキアのDNA複製機構に新たな知見を得ることを目的とした。今回、${it T. kodakaraensis polB}$遺伝子の完全破壊株の作製に成功した($$Delta$$${it polB}$株)。この株について17時間培養した菌体に、紫外線,メチルメタンスルホン酸,マイトマイシンC, $$gamma$$線といったDNA損傷ストレスを与えた後、固形培地上で培養した。その結果、親株に比して$$Delta$$${it polB}$株は、試みたすべてのDNA損傷ストレスに対して高感受性を示した。この結果から、PolBタンパク質は、${it T. kodakaraensis}$の細胞の生育には必須ではないが、DNA修復機構に深く関与していることが示唆された。

口頭

超好熱性アーキア${it Thermococcus kodakarensis}$DNAポリメラーゼB遺伝子破壊株のDNA損傷ストレス感受性の解析

櫛田 卓志*; 鳴海 一成; 藤原 伸介*; 今中 忠行*; 東端 啓貴*

no journal, , 

超好熱性アーキア${it Thermococcus kodakarensis}$には、ファミリーB型とファミリーD型の2種類のDNAポリメラーゼの遺伝子がそれぞれ1つずつ見いだされている。ファミリーB型のポリメラーゼPolBは、高いDNA伸長能と正確性を持つなどの特徴から、DNA複製に必須なポリメラーゼで、おもにリーディング鎖の合成を担っていると考えられてきた。しかし、完全遺伝子破壊株が作製できたことから、PolBが細胞の生育に必須ではなく、果たしてDNA複製に必須なのかどうかが疑問視され始めている。本研究では、当該遺伝子の破壊株のDNA損傷ストレスに対する感受性を解析し、${it Thermococcus kodakarensis}$のPolBの機能を推定することを目的とした。その結果、遺伝子破壊株が野生株に比べてさまざまな変異原に感受性を示したことから、PolBはDNA修復に重要な役割を果たしていることが示唆された。

口頭

Characteristics of DNA polymerase B in hyperthermophilic archaeon ${it Thermococcus kodakarensis}$

櫛田 卓志*; 鳴海 一成; 藤原 伸介*; 今中 忠行*; 東端 啓貴*

no journal, , 

${it Thermococcus kodakarensis}$${it polB}$遺伝子について解析を進める過程で、ポリメラーゼドメインの保存領域を欠失した変異株を取得し、PolBタンパク質が細胞の生育に必須ではない可能性を見いだした。そこで、${it T. kodakaraensis}$においてPolBタンパク質のDNA複製機構以外に果たす役割を解明することにより、超好熱性アーキアのDNA複製機構に新たな知見を得ることとした。今回、${it T. kodakaraensis polB}$遺伝子の完全破壊株の作製に成功した($$delta$$${it polB}$株)。この株について17時間培養した菌体に、紫外線,メチルメタンスルホン酸,マイトマイシンC, $$gamma$$線といったDNA損傷を与えた後、固形培地上で培養した。その結果、親株に比べて$$delta$$${it polB}$株は、試みたすべてのDNA損傷に対して高感受性を示した。この結果から、PolBタンパク質は、${it T. kodakaraensis}$の細胞の生育には必須ではないが、DNA修復機構に深く関与していることが強く示唆された。

口頭

超好熱性アーキア${it Thermococcus kodakarensis}$由来DNAポリメラーゼBのDNA修復における役割

東端 啓貴*; 櫛田 卓志*; 鳴海 一成; 今中 忠行*; 藤原 伸介*

no journal, , 

超好熱性アーキア${it Thermococcus kodakarensis}$には、ファミリーB型とファミリーD型の2種類のDNAポリメラーゼの遺伝子が、それぞれ1つずつ見いだされている。ファミリーB型のポリメラーゼPolBは、高いDNA伸長能と正確性を持つなどの特徴から、DNA複製に必須なポリメラーゼで、おもにリーディング鎖の合成を担っていると考えられてきた。しかし、完全遺伝子破壊株が作製できたことから、PolBが細胞の生育に必須ではなく、DNA複製に必須なのかどうかが疑問視され始めている。本研究では、当該遺伝子の破壊株のDNA損傷ストレスに対する感受性を解析し、${it T. kodakarensis}$のPolBの機能を推定することを目的とした。その結果、野生株と比較して、遺伝子破壊株はさまざまな変異原に感受性を示した、このことから、PolBはDNA修復に重要な役割を果たしていることが強く示唆された。

口頭

${it Thermococcus kodatarensis}$${it polB}$遺伝子破壊株の表現型解析

櫛田 卓志*; 鳴海 一成; 藤原 伸介*; 今中 忠行*; 東端 啓貴*

no journal, , 

超好熱性アーキア${it Thermococcus kodatarensis}$${it polB}$遺伝子破壊株の作製に成功し、DNA polymerase Bが当該微生物の生育に必須ではないことを発見した。また、この${it polB}$遺伝子破壊株はDNA損傷ストレスに対して高い感受性を示したことから、従来考えられていたDNA複製型polymeraseではなく、DNA修復型polymeraseであると強く示唆されている。一方、DNAは熱によっても不安定化し、化学的分解が促進される。例えば、脱プリン化に起因する鎖切断などがあげられ、熱によるDNA損傷も、最終的にはDNA polymeraseを含めた修復タンパク質による修復を受けると推測される。そこで現在、至適温度以上の高温条件における${it polB}$遺伝子破壊株の表現型解析を進めている。

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