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量子ビーム照射によって作出された昆虫寄生菌殺菌剤耐性変異体の遺伝子解析

Benomyl-tolerant mutation of entomopathogenic fungi induced by carbon ion beams

西東 力*; Fitriana, Y.*; 篠原 忍*; 佐藤 勝也; 鳴海 一成*

Saito, Tsutomu*; Fitriana, Y.*; Shinohara, Shinobu*; Sato, Katsuya; Narumi, Issey*

本研究の目的は、炭素イオンビームの照射による突然変異育種技術を用いて、昆虫病原糸状菌(${it Isaria fumosorosea}$及び${it Beauveria bassiana}$)の殺菌剤(ベノミル)耐性変異体を創出するとともに、変異体の諸性質を明らかにすることである。得られた変異体については、これまでにベノミル耐性レベル、他剤に対する耐性獲得、標的昆虫に対する病原性などを検討してきた。植物病原糸状菌の場合、ベノミル耐性の発現に$$beta$$チューブリン領域の変異が関与していることから、本研究で得られたベノミル耐性変異体について、この領域における塩基配列の変異を調べた。${it I. fumosorosea}$では、変異体の$$beta$$チューブリン遺伝子領域の塩基配列は親株と同じであった。一方、${it B. bassiana}$の場合、決定した変異体の$$beta$$チューブリン遺伝子の924番目の塩基AがCに変異しており、これにより$$beta$$チューブリンの198番目のアミノ酸がGluからAlaに置換されていた。これらの結果から、${it I. fumosorosea}$及び${it B. bassiana}$の変異体におけるベノミル耐性は、異なるメカニズムが寄与していると考えられた。

In order to identify the mutation sites of $$beta$$-tubulin in the benomyl-tolerant mutants, we determined the nucleotide sequences of $$beta$$-tubulin locus and compared with those of the wild-type strains. In ${it Isaria fumosorosea}$, the $$beta$$-tubulin sequences were identical to that of the wild-type, suggesting that other mechanisms might be responsible for the benomyl tolerance. On the other hand, in ${it Beauveria bassiana}$, the mutation was identified to be an A:T to C:G transversion at position 924 in the $$beta$$-tubulin gene. This mutation causes an amino acid substitution at position 198 (Glu to Ala) in the $$beta$$-tubulin protein. This site might be a binding target of benomyl or adjacent to the center of benomyl interaction with the $$beta$$-tubulin. These results suggest that mechanisms of benomyl tolerance were different between ${it I. fumosorosea}$ and ${it B. bassiana}$.

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