Ne, C and He ion beam irradiations have different effects on the expression of glutathione peroxidase in cultured human retinal vascular endothelial cells exposed to L-dopa

L-dopa処理した血管内皮細胞におけるグルタチオンペルオキシダーゼ遺伝子発現にイオンビーム照射が及ぼす影響

明尾 潔*; 浜田 信行*; 舟山 知夫; 明尾 庸子*; 小林 泰彦

Akeo, Kiyoshi*; Hamada, Nobuyuki*; Funayama, Tomoo; Akeo, Yoko*; Kobayashi, Yasuhiko

L-dopaが引き起こす網膜内皮細胞の膜脂質への損傷防止に、グルタチオンペルオキシダーゼ(GPX)がどのように働くかを調べるために、250MのL-dopaを含む培地で培養したヒト網膜内皮細胞をNe, C, Heのイオンビームで照射した。照射後培養した細胞を、0, 4, 8, 24時間後に回収し、抽出したRNAから合成したcDNAをテンプレートに、GPXと18S RNAの遺伝子発現量をリアルタイムRT-PCR法を用いて定量した。細胞へのL-dopa処理は、GPX遺伝子の発現を抑制した。L-dopa処理した網膜内皮細胞におけるGPX遺伝子の発現は、HeとCのイオンビームを照射した試料でより減少した。一方、Neイオンを照射した試料では、GPX遺伝子の発現量が増加していた。これらの結果は、イオンのLETの違いが、L-dopa処理した網膜内皮細胞におけるGPX遺伝子の発現の違いとなっている可能性を示唆している。

We investigate how L-dopa influences glutathione peroxidase (GPX) in preventing damage to membrane phopholipids of retinal endothelial cells (RE). Human RE incubated in vitro with 250 M L-dopa were exposed to heavy ion beams of 350 MeV Ne, 220 MeV C, and 50 MeV He. We collected RE after 0, 4, 8, 24 hrs of irradiation, extracted total cellular RNA, and synthesized cDNA, then the expression of GPX and 18S RNA were measured by realtime RT-PCR using specifically designed primers. The exposure to L-dopa inhibited the expression of GPX in RE. The expression of GPX in RE incubated with L-dopa decreased significantly after exposure to He and C. In contrast, Ne- ion beam irradiation significantly increased the expression of GPX in RE incubated with L-dopa. The result indicated that the difference of LET of ion species resulted to the different expression GPX in RE incubated with L-dopa.