高電位鉄硫黄タンパク質の高分解能中性子回折データ収集条件の検討

Preliminary neutron diffraction analysis of high-potential iron-sulfur protein

平野 優; 竹田 一旗*; 栗原 和男; 玉田 太郎; 三木 邦夫*

Hirano, Yu; Takeda, Kazuki*; Kurihara, Kazuo; Tamada, Taro; Miki, Kunio*

高電位鉄硫黄タンパク質(HiPIP)は、紅色光合成細菌においてシトクロム複合体から反応中心複合体への電子伝達を担う水溶性電子運搬タンパク質である。本研究では、HiPIPの高分解能中性子構造解析を目指して、大型結晶の作製、回折データ収集の条件検討を行った。結晶の大型化はマクロシーディング法により行い、体積2mmを超える結晶の作製に成功した。得られた大型結晶を用い、大強度陽子加速器施設J-PARCにおいて予備的回折実験を行ったところ、タンパク質としては世界最高分解能である1.1分解能の回折点を観測することができた。

High-potential iron-sulfur protein (HiPIP) is a soluble electron carrier protein that transfers electrons from cytochrome complex to the reaction center complex in photosynthetic purple bacteria. We prepared large crystals and examined conditions for diffraction data collection in order to obtain high-resolution neutron structure. We successfully obtained crystals with the volume over 2 mm by macro-seeding method. Preliminary diffraction analysis was performed at J-PARC, and the HiPIP crystal diffracted to 1.1 resolution that is the highest resolution in the protein neutron diffraction data.