ブレビバチルスによる超好熱古細菌由来セルラーゼ(EGPf)の分泌発現におけるHis-Tagの効果

Effect of HisTag on the secretion of cellulase EGPf by brevibacillus expression system

清水 瑠美; 廣本 武史; 安達 基泰; 黒木 良太; 片岡 未有*; 石川 一彦*

Shimizu, Rumi; Hiromoto, Takeshi; Adachi, Motoyasu; Kuroki, Ryota; Kataoka, Misumi*; Ishikawa, Kazuhiko*

中性子によるタンパク質の結晶構造解析においては、中性子ビーム強度が低いことから、X線結晶構造解析で用いられる結晶試料よりも格段に大きな体積(数mm)の結晶試料が必要である。そして、結晶の大型化には、多くのタンパク質試料が必要となる。中性子構造解析を目指した試料作製技術の高度化の一環として、ブレビバチルスによる様々なタンパク質の大量分泌生産を検討している。その一つの例として、超好熱古細菌由来のセルラーゼ(EGPf)の大量分泌発現に成功したので報告する。

For neutron crystal structure analysis of proteins, it is necessary to prepare large crystals in volume (several mm) compared to that required for X-ray crystal structure analysis. To prepare the large volume crystal, we inevitably need much amount of purified protein. As a development in preparation of samples for neutron crystal structure analysis of proteins, we have tried to develop expression system for many kinds of protein using Eschericha coli, Brevibacillus, Pichia pastoris, cultivation cell and so on. Recently, we have succeeded in high level expression of cellulose (EGPf) derived from Archaea using Brevibacillus system.