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Correlative microscopy with a laser-plasma soft X-ray microscope and a fluorescent microscope for biological imaging of live hydrated cells

レーザープラズマ軟X線顕微鏡と蛍光顕微鏡を組み合わせた相関顕微法による生きている細胞の観察

加道 雅孝; 岸本 牧; 保 智己*; 安田 恵子*; 青山 雅人*; 刀祢 重信*; 篠原 邦夫*

Kado, Masataka; Kishimoto, Maki; Tamotsu, Satoshi*; Yasuda, Keiko*; Aoyama, Masato*; Tone, Shigenobu*; Shinohara, Kunio*

高輝度レーザープラズマ軟X線源と密着型顕微法を組み合わせたレーザープラズマ軟X線顕微鏡を開発した。レーザープラズマ軟X線顕微鏡は、生きている細胞を1ナノ秒以下の短時間で瞬時に撮像することにより、生きている状態で撮像することを可能とする。我々は、生きている細胞の内部構造を高い空間分解能で観察できるレーザープラズマ軟X線顕微鏡と蛍光標識を用いることにより任意の細胞内小器官を選択的に可視化できる蛍光顕微鏡により同一の細胞を同時に観察する相関顕微法を考案した。相関顕微法により、生きている細胞とその様々な細胞内小器官を観察し、蛍光顕微鏡によって得られた細胞内小器官の位置情報を用いて軟X線顕微鏡で得られた細胞内構造を正確に特定した。蛍光顕微鏡よりも高い空間分解能を持つ軟X線顕微鏡の利点を生かすことにより、生きている細胞の細胞内小器官の詳細な構造を観察する顕微法を実現した。

A laser-plasma soft X-ray microscope which is combination of a highly intense laser-plasma soft X-ray source and contact microscopy has been developed. We have proposed a correlative microscopy with the laser-plasma soft X-ray microscope and a fluorescent microscope that is to observe the same biological cells with the both microscopes at the same time. Live hydrated biological cells and various cellular organelles of them have been observed with the correlative microscopy. Using the information of the cellular organelles obtained with the fluorescence microscope, inner structures obtained with the soft X-ray microscope are exactly identified. Since the spatial resolution of the soft X-ray microscope is much higher than that of the fluorescent microscope, fine structures of the cellular organelles of the live biological cells have been visualized with the correlative microscopy.

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