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Protein expression of ${it Saccharomyces cerevisiae}$ in response to uranium exposure

ウランを暴露させた${it Saccharomyces cerevisiae}$のタンパク質発現

坂本 文徳  ; 南川 卓也 ; 香西 直文   ; 藤井 力*; 家藤 治幸*; Francis, A. J.; 大貫 敏彦

Sakamoto, Fuminori; Nankawa, Takuya; Kozai, Naofumi; Fujii, Tsutomu*; Iefuji, Haruyuki*; Francis, A. J.; Onuki, Toshihiko

$$^{238}$$U(VI)と$$^{233}$$U(VI)を含む培地で培養した${it Saccharomyces cerevisiae}$の発現タンパク質を二次元電気泳動で分析した。${it S. cerevisiae}$BY4743株を5.0 $$times$$ 10$$^{-4}$$M濃度の$$^{238}$$U又は2.5 $$times$$ 10$$^{-6}$$ (2.0 $$times$$ 10$$^{-4}$$M濃度の$$^{238}$$Uより350倍放射能が強い)と5.0 $$times$$ 10$$^{-6}$$M濃度の$$^{233}$$Uを含む培地で、30$$^{circ}$$Cで112時間培養した上記培地での酵母の生育度はコントロール$$>$$ 2.5 $$times$$ 10$$^{-6}$$M $$^{233}$$U $$>$$ 2.0 $$times$$ 10$$^{-4}$$M $$^{238}$$U $$>$$ 5.0 $$times$$ 10$$^{-6}$$M $$^{233}$$U $$>$$ 5.0 $$times$$ 10$$^{-4}$$M $$^{238}$$Uの順であった。この結果は、ウランの放射線効果だけでなく化学的効果が酵母の生育に影響していることを示唆している。培地溶液中の$$^{238}$$U又は$$^{233}$$Uの濃度が減少していることからウランが酵母細胞に濃集していることを示している。$$^{238}$$U又は$$^{233}$$Uに暴露させた酵母タンパク質の二次元電気泳動解析では、ウランが存在しないコントロールでは見られないスポットが確認された。この結果は、ウラン存在下の酵母が特異的なタンパク質を発現していることを示している。

Protein expression of ${it Saccharomyces cerevisiae}$ grown in the medium containing $$^{238}$$U(VI) and $$^{233}$$U(VI) was examined by two-dimensional gel electrophoresis. ${it S. cerevisiae}$ of BY4743 was grown in medium containing $$^{238}$$U of 0, 2.0, and 5.0 $$times$$ 10$$^{-4}$$ M or $$^{233}$$U of 2.5 $$times$$ 10$$^{-6}$$ (radioactivity was higher by 350 times than 2.0 $$times$$ 10$$^{-4}$$ M $$^{238}$$U) and 5.0 $$times$$ 10$$^{-6}$$ M for 112 h at 30$$^{circ}$$C. The growths of the yeast grown in the above media were in the following order: control $$>$$ 2.5 $$times$$ 10$$^{-6}$$ M $$^{233}$$U $$>$$ 2.0 $$times$$ 10$$^{-4}$$ M $$^{238}$$U $$>$$ 5.0 $$times$$ 10$$^{-6}$$ M $$^{233}$$U $$>$$ 5.0 $$times$$ 10$$^{-4}$$ M $$^{238}$$U. This result indicated that not only radiological but also chemical effect of U reduced the growth of the yeast. The concentrations of U in the medium containing $$^{238}$$U or $$^{233}$$U decreased, suggesting U accumulation by the yeast cells. The 2-D gel electrophoresis analysis showed the appearance of several spots after exposure to $$^{238}$$U or to $$^{233}$$U but not in the control containing no uranium. These results show that the yeast cells exposed to U express several specific proteins.

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