放射線抵抗性細菌デイノコッカス・ラジオデュランス遺伝子の放射線応答プロモーターの解析

Analysis of radiation responsive promoter of the gene

大庭 寛史*; 佐藤 勝也*; 柳沢 忠*; 鳴海 一成

Oba, Hirofumi*; Sato, Katsuya*; Yanagisawa, Tadashi*; Narumi, Issei

放射線抵抗性細菌デイノコッカス・ラジオデュランスの優れたDNA二本鎖切断修復には、DNA損傷が生じた後に合成されるタンパク質が必要である。これまでに、デイノコッカス・ラジオデュランスの放射線抵抗性に中心的役割を担う新規放射線誘導性タンパク質PprAを同定した。しかしながら、放射線応答の分子機構を明らかにすることが重要であるにもかかわらず、放射線誘導性タンパク質の放射線応答プロモーターについてほとんど明らかにされていない。そこで本研究では、遺伝子プロモーターの放射線応答機構について解析を行った。放射線応答に関与するプロモーター領域を同定するため、ルシフェラーゼ遺伝子を用いたレポーターアッセイにより、放射線照射による遺伝子プロモーター活性変動を解析した。遠位のプロモーターは-208から-156領域に、近位のプロモーターは-57から-22領域に存在すること、そして、-57から-38領域が最小必要プロモーター領域であることを明らかにした。さらに、部位特異的変異導入法による解析から、-33位のチミンが放射線応答プロモーターの主要な塩基であることを明らかにした。また、遺伝子産物は放射線応答において上位制御因子と考えられているが、遺伝子破壊株における遺伝子プロモーター活性を解析したところ、遺伝子発現は遺伝子産物によりプロモーターレベルで制御されていることが明らかになった。

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